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来源：2025-03-13 14:49:01
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体外肝代谢模型（肝细胞、肝微粒体、肝S9 及肝胞质液）在药物代谢、药物相互作用及毒性研究中具有重要作用。本文将详细介绍这些代谢体系的制备流程，并提供适用于研究的参考。肝细胞（Hepatocytes）
肝细胞（Hepatocytes）的制备：
肝脏灌流：以冰冷的 HBSS 清洗肝脏，去除血液。用肝素化HBSS缓冲液灌流肝门静脉，保持 37℃，去除残留血液。酶消化：更换含有 0.05% 胶原酶的缓冲液，在37℃下灌流 5-10分钟，分解细胞外基质。肝组织解离：轻柔捣碎消化后的肝脏，并过滤去除组织碎片。离心分离：以50 g离心2-3次，去除死细胞和杂质，收集存活肝细胞。细胞计数及纯化：用台盼蓝评估细胞活性（>85%视为可用）。使用密度梯度离心进一步纯化肝细胞。保存与使用：新鲜肝细胞需在4℃短期保存，或冷冻（液氮）长期存储。复苏后需尽快用于实验，避免活性丧失。
肝微粒体（Liver Microsomes）、肝S9、胞质液的制备
匀浆处理：将肝脏组织在冷PBS溶液中均质化，确保样品充分解离。低速离（12,000 g，10 min）：去除细胞碎片、核和未破裂细胞，收集上清，即肝S9。将肝S9上清进一步高速离心（104000 g，10 min）后，取上清，即胞质液，将沉淀洗涤之后再进行高速离心后取沉淀即为肝微粒体。
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